-
Šalto spaudimo ekologiškas jojobos aliejus simondsijų sėklų nešiklio aliejus skirtas odos priežiūros masažui
Pagrindinės natūralaus jojobos aliejaus sudedamosios dalys yra palmitino rūgštis, eruko rūgštis, oleino rūgštis ir gadoleino rūgštis. Jojobos aliejuje taip pat gausu vitaminų, tokių kaip vitaminas E ir vitaminų B kompleksas.
Skystas jojobos augalo vaškas yra auksinės spalvos. Jojobos žolelių aliejus turi būdingą riešutų aromatą ir yra pageidaujamas priedas prie asmeninės priežiūros produktų, tokių kaip kremai, makiažas, šampūnas ir kt. Jojobos žolelių aliejus gali būti tepamas tiesiai ant odos nuo saulės nudegimo, psoriazės ir spuogų. Grynas simondsijų aliejus taip pat skatina plaukų augimą.
-
Natūralus grynas organinis levandų eterinis aliejus skirtas aromaterapinei odos priežiūrai
Ekstrahavimo arba apdorojimo būdas: distiliuotas garais
Distiliavimo ekstrahavimo dalis: gėlė
Šalies kilmė: Kinija
Naudojimas: difuzinė/aromaterapija/masažas
Galiojimo laikas: 3 metai
Individualizuota paslauga: individuali etiketė ir dėžutė arba pagal jūsų reikalavimą
Sertifikavimas: GMPC/FDA/ISO9001/MSDS/COA
-
100 % grynas natūralus organinis Magnoliae Officmalis Cortex aliejaus eterinis aliejus, skirtas odos priežiūrai
Hou Po kvapas iš karto yra kartokas ir aštriai aitrus, o po to palaipsniui atsiskleidžia su giliu, sirupo saldumu ir šiluma.
Hou Po yra susijęs su Žemės ir metalo elementais, kur karčioji šiluma stipriai nuleidžia Qi ir sausą drėgmę. Dėl šių savybių jis naudojamas kinų medicinoje siekiant palengvinti sąstingį ir kaupimąsi virškinimo trakte, taip pat kosulį ir švokštimą dėl skreplių, trukdančių plaučius.
Magnolia Officinials yra lapuočių medis, kilęs iš Sičuano, Hubėjaus ir kitų Kinijos provincijų kalnų ir slėnių. Labai aromatinga žievė, naudojama tradicinėje kinų medicinoje, nulupama nuo stiebų, šakų ir šaknų. Surenkama nuo balandžio iki birželio mėn. Stora, lygi žievė, tanki aliejaus, vidinėje pusėje yra purpurinės spalvos su krištoliniu blizgesiu.
Gydytojai gali apsvarstyti galimybę Hou Po derinti su Qing Pi eteriniu aliejumi kaip geriausiu komplimentu mišiniuose, skirtuose suskaidyti sankaupas.
-
OEM Custom Package Natural Macrocephalae Rhizoma aliejus
Kaip veiksmingas chemoterapinis agentas, 5-fluorouracilas (5-FU) plačiai taikomas piktybiniams virškinimo trakto, galvos, kaklo, krūtinės ir kiaušidžių navikams gydyti. O 5-FU yra pirmosios eilės vaistas nuo gaubtinės ir tiesiosios žarnos vėžio klinikoje. 5-FU veikimo mechanizmas yra blokuoti uracilo nukleorūgšties transformaciją į timino nukleorūgštį naviko ląstelėse, tada paveikti DNR ir RNR sintezę ir atstatymą, kad būtų pasiektas citotoksinis poveikis (Afzal ir kt., 2009; Ducreux ir kt. al., 2015; Longley ir kt., 2003). Tačiau 5-FU taip pat sukelia chemoterapijos sukeltą viduriavimą (CID), vieną iš dažniausiai pasitaikančių nepageidaujamų reakcijų, kamuojančių daugelį pacientų (Filho ir kt., 2016). Viduriavimo dažnis pacientams, gydytiems 5-FU, buvo iki 50–80 %, o tai labai paveikė chemoterapijos eigą ir veiksmingumą (Iacovelli ir kt., 2014; Rosenoff ir kt., 2006). Todėl labai svarbu rasti veiksmingą 5-FU sukeltos CID gydymą.
Šiuo metu į CID klinikinį gydymą įtrauktos nemedikamentinės intervencijos ir vaistų intervencijos. Ne narkotikų intervencijos apima pagrįstą mitybą ir papildymą druska, cukrumi ir kitomis maistinėmis medžiagomis. Tokie vaistai, kaip loperamidas ir oktreotidas, dažniausiai naudojami CID gydymui nuo viduriavimo (Benson ir kt., 2004). Be to, įvairiose šalyse etnomedicina taip pat yra pritaikyta CID gydyti taikant savo unikalią terapiją. Tradicinė kinų medicina (TCM) yra viena tipiška etnomedicina, kuri buvo praktikuojama daugiau nei 2000 metų Rytų Azijos šalyse, įskaitant Kiniją, Japoniją ir Korėją (Qi ir kt., 2010). TCM teigia, kad chemoterapiniai vaistai sukeltų Qi vartojimą, blužnies trūkumą, skrandžio disharmoniją ir endofitinį drėgmę, dėl ko sutriktų laidžioji žarnyno funkcija. TCM teorijoje CID gydymo strategija daugiausia turėtų priklausyti nuo Qi papildymo ir blužnies stiprinimo (Wang ir kt., 1994).
Džiovintos šaknysAtractylodes macrocephalaKoidz. (AM) irPanax ženšenisCA Mey. (PG) yra tipiški žoliniai vaistai TCM, turintys tą patį poveikį, papildydami Qi ir stiprindami blužnį (Li ir kt., 2014). AM ir PG paprastai naudojami kaip žolelių pora (paprasčiausia kinų vaistažolių suderinamumo forma), kurios papildo Qi ir stiprina blužnį gydant viduriavimą. Pavyzdžiui, AM ir PG buvo užfiksuoti klasikinėse antidiarėjos formulėse, tokiose kaip Shen Ling Bai Zhu San, Si Jun Zi Tang iš.Taipingas Huiminas Heji Ju Fangas(Dainų dinastija, Kinija) ir Bu Zhong Yi Qi Tang išPi Wei Lun(Juanių dinastija, Kinija) (1 pav.). Keli ankstesni tyrimai pranešė, kad visos trys formulės gali sumažinti CID (Bai ir kt., 2017; Chen ir kt., 2019; Gou ir kt., 2016). Be to, mūsų ankstesnis tyrimas parodė, kad Shenzhu kapsulė, kurioje yra tik AM ir PG, gali turėti įtakos viduriavimo, kolito (xiexie sindromo) ir kitų virškinimo trakto ligų gydymui (Feng ir kt., 2018). Tačiau jokiame tyrime nebuvo aptartas AM ir PG poveikis ir mechanizmas gydant CID, tiek kartu, tiek atskirai.
Dabar manoma, kad žarnyno mikrobiota yra potencialus veiksnys, padedantis suprasti TCM terapinį mechanizmą (Feng ir kt., 2019). Šiuolaikiniai tyrimai rodo, kad žarnyno mikrobiota vaidina lemiamą vaidmenį palaikant žarnyno homeostazę. Sveika žarnyno mikrobiota prisideda prie žarnyno gleivinės apsaugos, medžiagų apykaitos, imuninės homeostazės ir atsako bei patogenų slopinimo (Thursby ir Juge, 2017; Pickard ir kt., 2017). Sutrikusi žarnyno mikrobiota tiesiogiai ar netiesiogiai pažeidžia žmogaus kūno fiziologines ir imunines funkcijas, sukeldama šalutinį poveikį, pavyzdžiui, viduriavimą (Patel ir kt., 2016; Zhao ir Shen, 2010). Tyrimai parodė, kad 5-FU labai pakeitė viduriuojančių pelių žarnyno mikrobiotos struktūrą (Li ir kt., 2017). Todėl AM ir PM poveikį 5-FU sukeltam viduriavimui gali lemti žarnyno mikrobiota. Tačiau vis dar nežinoma, ar vien tik AM ir PG ir kartu galėtų užkirsti kelią 5-FU sukeltam viduriavimui moduliuodami žarnyno mikrobiotą.
Siekdami ištirti antidiarėjos poveikį ir pagrindinį AM ir PG mechanizmą, naudojome 5-FU, kad imituotume pelių viduriavimo modelį. Čia mes sutelkėme dėmesį į galimą vieno ir kombinuoto administravimo (AP) poveikįAtractylodes macrocephalaeterinis aliejus (AMO) irPanax ženšenisviso saponinų (PGS), aktyvių komponentų, atitinkamai ekstrahuotų iš AM ir PG, viduriavimui, žarnyno patologijai ir mikrobų struktūrai po 5-FU chemoterapijos.
-
100 % grynas natūralus Eucommiae Foliuml Oil eterinis aliejus odos priežiūrai
Eucommia ulmoides(ES) (kinų kalba paprastai vadinamas „Du Zhong“) priklauso Eucommiaceae šeimai, mažų medžių, kilusių iš Centrinės Kinijos, genčiai.1]. Šis augalas Kinijoje plačiai auginamas dideliu mastu dėl savo gydomosios svarbos. Iš ES buvo išskirta apie 112 junginių, tarp kurių yra lignanai, iridoidai, fenoliai, steroidai ir kiti junginiai. Papildomos šio augalo žolelių formulės (pvz., skanios arbatos) parodė tam tikras gydomąsias savybes. ES lapų aktyvumas yra didesnis, susijęs su žieve, gėlėmis ir vaisiais [2,3]. Buvo pranešta, kad ES lapai stiprina kaulų stiprumą ir kūno raumenis [4], todėl ilgaamžiškumas ir skatinamas žmonių vaisingumas [5]. Buvo pranešta, kad skani arbatos formulė, pagaminta iš ES lapų, mažina riebumą ir pagerina energijos apykaitą. Buvo pranešta, kad flavonoidiniai junginiai (pvz., rutinas, chlorogeno rūgštis, ferulo rūgštis ir kavos rūgštis) pasižymi antioksidaciniu aktyvumu ES lapuose.6].
Nors literatūros apie ES fitochemines savybes buvo pakankamai, buvo atlikta nedaug įvairių junginių, išgautų iš ES žievės, sėklų, stiebų ir lapų, farmakologinių savybių tyrimų. Šiame apžvalginiame dokumente bus išaiškinta išsami informacija apie įvairius junginius, išgautus iš įvairių ES dalių (žievės, sėklų, stiebo ir lapų), ir apie numatomą šių junginių panaudojimą sveikatai palankioms savybėms su moksliniais įrodymais ir taip bus pateikta pamatinė medžiaga. dėl ES taikymo.
-
Grynas natūralus Houttuynia Cordata aliejus Houttuynia Cordata Oil Lchthammolum aliejus
Daugumoje besivystančių šalių 70–95 % gyventojų pirminei sveikatos priežiūrai naudojasi tradiciniais vaistais, o iš jų 85 % žmonių kaip veikliąją medžiagą naudoja augalus arba jų ekstraktus.1] Naujų biologiškai aktyvių junginių iš augalų paieška dažniausiai priklauso nuo konkrečios etninės ir liaudiškos informacijos, gautos iš vietinių praktikų, ir vis dar laikoma svarbiu vaistų atradimo šaltiniu. Indijoje apie 2000 vaistų yra augalinės kilmės.2] Atsižvelgiant į platų susidomėjimą vaistinių augalų vartojimu, ši apžvalga apieHouttuynia cordataThunb. teikia naujausią informaciją, susijusią su botaniniais, komerciniais, etnofarmakologiniais, fitocheminiais ir farmakologiniais tyrimais, kurie pasirodo literatūroje.H. cordataThunb. priklauso šeimaiSaururaceaeir paprastai žinomas kaip Kinijos driežo uodega. Tai daugiametis žolinis augalas, turintis du skirtingus chemotipus.3,4] Kiniškas rūšies chemotipas aptinkamas laukinėmis ir pusiau laukinėmis sąlygomis šiaurės rytų Indijoje nuo balandžio iki rugsėjo.[5,6,7]H. cordatayra Indijoje, ypač Asamo Brahmaputros slėnyje, ir yra naudojamas įvairių Asamo genčių daržovių pavidalu, taip pat įvairiais medicininiais tikslais tradiciškai.
-
100% PureArctium lappa aliejus Gamintojas – Natūralus kalkių aliejus Arctium lappa aliejus su kokybės užtikrinimo sertifikatais
Nauda sveikatai
Varnalėšos šaknis dažnai valgoma, tačiau jas taip pat galima džiovinti ir mirkyti arbatoje. Jis gerai veikia kaip inulino šaltinis, aprebiotikasskaidulų, kurios gerina virškinimą ir gerina žarnyno sveikatą. Be to, šioje šaknyje yra flavonoidų (augalų maistinių medžiagų),fitocheminės medžiagosir antioksidantų, kurie, kaip žinoma, turi naudos sveikatai.
Be to, varnalėšų šaknis gali suteikti kitų privalumų, pavyzdžiui:
Sumažinti lėtinį uždegimą Varnalėšos šaknyse yra daug antioksidantų, tokių kaip kvercetinas, fenolio rūgštys ir liuteolinas, kurie gali padėti apsaugoti jūsų ląsteles nuolaisvųjų radikalų. Šie antioksidantai padeda sumažinti uždegimą visame kūne.
Pavojai sveikatai
Varnalėšos šaknis laikoma saugia valgyti ar gerti kaip arbatą. Tačiau šis augalas labai panašus į belladonna nakvišų augalus, kurie yra toksiški. Varnalėšos šaknis rekomenduojama pirkti tik iš patikimų pardavėjų ir susilaikyti nuo jų rinkimo patiems. Be to, informacijos apie jo poveikį vaikams ar nėščioms moterims yra labai mažai. Pasitarkite su savo gydytoju prieš vartodami varnalėšų šaknis su vaikais arba jei esate nėščia.
Štai keletas kitų galimų pavojų sveikatai, į kuriuos reikia atsižvelgti vartojant varnalėšų šaknis:
Padidėjusi dehidratacija
Varnalėšos šaknis veikia kaip natūralus diuretikas, kuris gali sukelti dehidrataciją. Jei vartojate vandens piliulę ar kitus diuretikus, neturėtumėte vartoti varnalėšų šaknų. Jei vartojate šiuos vaistus, svarbu žinoti apie kitus vaistus, žoleles ir sudedamąsias dalis, kurios gali sukelti dehidrataciją.
Alerginė reakcija
Jei esate jautrus arba esate buvęs alerginių reakcijų į ramunes, ambroziją ar chrizantemas, padidėja alerginės reakcijos į varnalėšų šaknis rizika.
-
Didmeninė kaina 100 % grynas AsariRadix Et Rhizoma aliejus Relax Aromatherapy Eucalyptus globulus
Tyrimai su gyvūnais ir in vitro ištyrė galimą sassafras ir jo komponentų priešgrybelinį, priešuždegiminį ir širdies ir kraujagyslių sistemos poveikį. Tačiau klinikinių tyrimų trūksta, o sassafras nėra laikomas saugiu naudoti. JAV Maisto ir vaistų administracija (FDA) uždraudė safrolį, pagrindinę sasafras šaknų žievės ir aliejaus sudedamąją dalį, be kita ko, naudoti kaip kvapiąją ar kvapiąją medžiagą, ir neturėtų būti naudojamas viduje ar išorėje, nes jis gali būti kancerogeninis. Safrolis buvo naudojamas nelegaliai gaminant 3,4-metilendioksimetamfetaminą (MDMA), dar žinomą gatvių pavadinimais „ecstasy“ arba „Molly“, o safrolio ir sasafraso aliejaus pardavimą stebi JAV narkotikų kontrolės tarnyba.
-
Didmeninė kaina 100% grynas Stellariae Radix eterinis aliejus (naujas) Relax Aromatherapy Eucalyptus globulus
Kinijos farmakopėja (2020 m. leidimas) reikalauja, kad YCH metanolio ekstraktas būtų ne mažesnis kaip 20,0 % [2], nenurodant kitų kokybės vertinimo rodiklių. Šio tyrimo rezultatai rodo, kad tiek laukinių, tiek kultivuotų mėginių metanolio ekstraktų turinys atitiko farmakopėjos standartą ir reikšmingo skirtumo tarp jų nebuvo. Todėl pagal šį indeksą nebuvo akivaizdaus kokybės skirtumo tarp laukinių ir auginamų mėginių. Tačiau bendras sterolių ir flavonoidų kiekis laukiniuose mėginiuose buvo žymiai didesnis nei kultivuotuose mėginiuose. Tolesnė metabolominė analizė atskleidė didelę metabolitų įvairovę tarp laukinių ir auginamų mėginių. Be to, buvo atrinkti 97 reikšmingai skirtingi metabolitai, kurie išvardytiPapildoma S2 lentelė. Tarp šių labai skirtingų metabolitų yra β-sitosterolis (ID yra M397T42) ir kvercetino dariniai (M447T204_2), kurie, kaip pranešta, yra veikliosios medžiagos. Anksčiau nenurodytos sudedamosios dalys, tokios kaip trigonelinas (M138T291_2), betainas (M118T277_2), fustinas (M269T36), rotenonas (M241T189), arctinas (M557T165) ir logano rūgštis (M399T284), taip pat buvo įtrauktos į skirtingus metabolitus. Šie komponentai atlieka įvairius antioksidacinius, priešuždegiminius, laisvųjų radikalų šalinimo, vėžio ir aterosklerozės gydymo vaidmenis, todėl gali būti tariamai nauji aktyvūs YCH komponentai. Veikliųjų medžiagų kiekis lemia vaistinių medžiagų veiksmingumą ir kokybę [7]. Apibendrinant, metanolio ekstraktas, kaip vienintelis YCH kokybės vertinimo indeksas, turi tam tikrų apribojimų, todėl reikia toliau tirti konkretesnius kokybės žymenis. Buvo reikšmingų skirtumų tarp laukinių ir auginamų YCH bendrų sterolių, flavonoidų ir daugelio kitų skirtingų metabolitų; taigi, tarp jų gali būti tam tikrų kokybės skirtumų. Tuo pačiu metu naujai atrastos potencialios YCH veikliosios medžiagos gali turėti svarbią pamatinę vertę tiriant YCH funkcinį pagrindą ir toliau plėtojant YCH išteklius.
Tikrų vaistinių medžiagų svarba jau seniai buvo pripažinta specifiniame kilmės regione gaminant puikios kokybės kiniškus vaistažoles.8]. Aukšta kokybė yra esminis autentiškų vaistinių medžiagų požymis, o buveinė yra svarbus veiksnys, turintis įtakos tokių medžiagų kokybei. Nuo tada, kai YCH buvo pradėtas naudoti kaip vaistas, jame ilgą laiką dominavo laukinis YCH. Po sėkmingo YCH įvedimo ir prijaukinimo Ningxia 1980 m., Yinchaihu vaistinių medžiagų šaltinis pamažu perėjo iš laukinių į auginamus YCH. Remiantis ankstesniu YCH šaltinių tyrimu [9] ir mūsų tyrėjų grupės lauko tyrinėjimai, pastebimi reikšmingi kultūrinių ir laukinių vaistinių medžiagų paplitimo plotų skirtumai. Laukinis YCH daugiausia paplitęs Ningxia Hui autonominiame Šaansi provincijos regione, greta sausringos Vidinės Mongolijos ir centrinės Ningsijos zonos. Visų pirma, dykumos stepė šiose vietose yra tinkamiausia buveinė YCH augimui. Priešingai, kultivuojamas YCH daugiausia paplitęs laukinės paplitimo zonos pietuose, pvz., Tongxin apygardoje (I kultivuojama) ir jos apylinkėse, kuri tapo didžiausia auginimo ir gamybos baze Kinijoje, ir Pengyang apygardoje (II auginama). , kuri yra pietesnėje vietovėje ir yra dar viena auginamų YCH gamybos sritis. Be to, pirmiau minėtų dviejų auginamų plotų buveinės nėra dykumos stepės. Todėl, be auginimo būdo, reikšmingų skirtumų yra ir laukinių bei auginamų YCH buveinėje. Buveinė yra svarbus veiksnys, turintis įtakos augalinių vaistinių medžiagų kokybei. Skirtingos buveinės turės įtakos antrinių metabolitų susidarymui ir kaupimuisi augaluose, taip paveikdamos vaistų kokybę [10,11]. Todėl reikšmingi bendro flavonoidų ir bendro sterolių kiekio bei 53 metabolitų ekspresijos skirtumai, kuriuos nustatėme šiame tyrime, gali būti lauko valdymo ir buveinių skirtumų rezultatas.Vienas iš pagrindinių būdų, kaip aplinka daro įtaką vaistinių medžiagų kokybei, yra streso darymas šaltiniams augalams. Vidutinis aplinkos stresas skatina antrinių metabolitų kaupimąsi [12,13]. Augimo ir diferenciacijos pusiausvyros hipotezė teigia, kad kai maistinių medžiagų yra pakankamai, augalai pirmiausia auga, o kai trūksta maistinių medžiagų, augalai daugiausia diferencijuojasi ir gamina daugiau antrinių metabolitų.14]. Dėl vandens trūkumo sukeltas sausros stresas yra pagrindinis aplinkos stresas, su kuriuo susiduria augalai sausose vietovėse. Šiame tyrime auginamo YCH vandens būklė yra gausesnė, o metinis kritulių kiekis yra žymiai didesnis nei laukinio YCH (vandens atsargos Cultivated I buvo maždaug 2 kartus didesnės nei laukinės; Cultivated II buvo apie 3,5 karto daugiau nei laukinės). ). Be to, laukinėje aplinkoje dirvožemis yra smėlingas, o dirbamose žemėse – molingas. Palyginti su moliu, smėlingas dirvožemis turi prastą vandens sulaikymo gebą ir labiau padidina sausros stresą. Tuo pačiu metu auginimo procesą dažnai lydėjo laistymas, todėl sausros streso laipsnis buvo mažas. Laukinė YCH auga atšiauriose natūraliose sausringose buveinėse, todėl gali patirti rimtesnį sausros stresą.Osmoreguliacija yra svarbus fiziologinis mechanizmas, kuriuo augalai susidoroja su sausros stresu, o alkaloidai yra svarbūs osmosiniai reguliatoriai aukštesniuose augaluose.15]. Betainai yra vandenyje tirpūs alkaloidiniai ketvirtiniai amonio junginiai ir gali veikti kaip osmoprotektoriai. Sausros stresas gali sumažinti ląstelių osmosinį potencialą, o osmoprotektoriai išsaugo ir palaiko biologinių makromolekulių struktūrą ir vientisumą bei efektyviai sumažina sausros streso daromą žalą augalams.16]. Pavyzdžiui, esant sausrai, betaino kiekis cukrinių runkelių ir Lycium barbarum labai padidėjo.17,18]. Trigonelinas yra ląstelių augimo reguliatorius, o esant sausros stresui, jis gali pailginti augalų ląstelių ciklo trukmę, slopinti ląstelių augimą ir sukelti ląstelių tūrio mažėjimą. Santykinis tirpių medžiagų koncentracijos padidėjimas ląstelėje leidžia augalui pasiekti osmosinį reguliavimą ir padidinti jo gebėjimą atsispirti sausros stresui.19]. JIA X [20] nustatė, kad padidėjus sausros stresui, Astragalus membranaceus (tradicinės kinų medicinos šaltinis) pagamino daugiau trigonelino, kuris reguliuoja osmosinį potencialą ir pagerina gebėjimą atsispirti sausros stresui. Taip pat įrodyta, kad flavonoidai vaidina svarbų vaidmenį augalų atsparumui sausrai.21,22]. Daugybė tyrimų patvirtino, kad vidutinis sausros stresas buvo palankus flavonoidų kaupimuisi. Lang Duo-Yong ir kt. [23] palygino sausros streso poveikį YCH kontroliuojant vandens sulaikymo pajėgumus lauke. Nustatyta, kad sausros stresas tam tikru mastu stabdė šaknų augimą, tačiau esant vidutiniam ir stipriam sausros stresui (40 % lauko vandens sulaikymo pajėgumas), bendras flavonoidų kiekis YCH padidėjo. Tuo tarpu, esant sausros stresui, fitosteroliai gali reguliuoti ląstelių membranų sklandumą ir pralaidumą, slopinti vandens praradimą ir pagerinti atsparumą stresui.24,25]. Todėl padidėjęs bendro flavonoidų, bendro sterolių, betaino, trigonelino ir kitų antrinių metabolitų kaupimasis laukiniame YCH gali būti susijęs su didelio intensyvumo sausros stresu.Šiame tyrime KEGG kelio praturtinimo analizė buvo atlikta su metabolitais, kurie, kaip nustatyta, labai skiriasi tarp laukinių ir auginamų YCH. Praturtinti metabolitai apėmė tuos, kurie dalyvauja askorbato ir aldarato metabolizmo keliuose, aminoacilo-tRNR biosintezėje, histidino metabolizme ir beta-alanino metabolizme. Šie medžiagų apykaitos keliai yra glaudžiai susiję su augalų atsparumo stresui mechanizmais. Tarp jų, askorbato metabolizmas atlieka svarbų vaidmenį augalų antioksidantų gamyboje, anglies ir azoto metabolizme, atsparumui stresui ir kitoms fiziologinėms funkcijoms.26]; aminoacil-tRNR biosintezė yra svarbus baltymų susidarymo būdas.27,28], kuris dalyvauja stresui atsparių baltymų sintezėje. Tiek histidino, tiek β-alanino keliai gali padidinti augalų toleranciją aplinkos stresui [29,30]. Tai taip pat rodo, kad metabolitų skirtumai tarp laukinių ir auginamų YCH buvo glaudžiai susiję su atsparumo stresui procesais.Dirvožemis yra materialus vaistinių augalų augimo ir vystymosi pagrindas. Dirvožemyje esantis azotas (N), fosforas (P) ir kalis (K) yra svarbūs maistiniai elementai augalų augimui ir vystymuisi. Dirvožemio organinėse medžiagose taip pat yra N, P, K, Zn, Ca, Mg ir kitų vaistiniams augalams reikalingų makroelementų bei mikroelementų. Maistinių medžiagų perteklius arba trūkumas arba nesubalansuoti maistinių medžiagų santykiai turės įtakos augimui ir vystymuisi bei vaistinių medžiagų kokybei, o skirtingi augalai turi skirtingus maistinių medžiagų poreikius [31,32,33]. Pavyzdžiui, mažas N stresas skatino Isatis indigotica alkaloidų sintezę ir buvo naudingas flavonoidų kaupimuisi augaluose, tokiuose kaip Tetrastigma hemsleyanum, Crataegus pinnatifida Bunge ir Dichondra repens Forst. Priešingai, per daug azoto slopino flavonoidų kaupimąsi tokiose rūšyse kaip Erigeron breviscapus, Abrus cantoniensis ir Ginkgo biloba ir paveikė vaistinių medžiagų kokybę.34]. P trąšos buvo veiksmingos didinant glicirizo rūgšties ir dihidroacetono kiekį Uralo saldymedyje.35]. Kai naudojimo kiekis viršijo 0,12 kg·m-2, bendras flavonoidų kiekis Tussilago farfara sumažėjo [36]. P trąšų naudojimas neigiamai paveikė polisacharidų kiekį tradicinėje kinų medicinoje rhizoma polygonati [37], tačiau K trąšos veiksmingai padidino saponinų kiekį [38]. 450 kg · hm−2 K trąšos geriausiai padėjo augti ir kaupti saponinus dvejų metų Panax notoginseng [39]. Esant santykiui N:P:K = 2:2:1, bendras hidroterminio ekstrakto, harpagido ir harpagozido kiekis buvo didžiausias [40]. Didelis N, P ir K santykis buvo naudingas skatinant Pogostemon cablin augimą ir didinant lakiųjų aliejų kiekį. Mažas N, P ir K santykis padidino pagrindinių veiksmingų Pogostemon stiebo lapų aliejaus komponentų kiekį.41]. YCH yra nevaisingam dirvožemiui atsparus augalas ir gali turėti specifinių maistinių medžiagų, tokių kaip N, P ir K, poreikį. Šiame tyrime, palyginti su kultivuojamu YCH, laukinių YCH augalų dirvožemis buvo gana nederlingas: dirvožemio turinys. organinių medžiagų, bendro N, bendro P ir bendro K buvo atitinkamai apie 1/10, 1/2, 1/3 ir 1/3 kultūrinių augalų. Todėl dirvožemio maistinių medžiagų skirtumai gali būti dar viena priežastis, dėl kurios skiriasi metabolitai, aptikti kultūriniame ir laukiniame YCH. Weibao Ma ir kt. [42] nustatė, kad įterpus tam tikrą kiekį N ir P trąšų, gerokai pagerėjo sėklų derlius ir kokybė. Tačiau maistinių elementų poveikis YCH kokybei nėra aiškus, todėl reikia toliau tirti tręšimo priemones, gerinančias vaistinių medžiagų kokybę.Kinijos vaistažolių preparatai pasižymi tokiomis savybėmis: „Palankios buveinės skatina derlių, o nepalankios buveinės gerina kokybę“.43]. Palaipsniui pereinant nuo laukinių prie kultivuotų YCH, augalų buveinė pasikeitė iš sausringos ir nederlingos dykumos stepės į derlingą dirbamą žemę su gausesniu vandeniu. Auginamų YCH buveinė yra pranašesnė, o derlius didesnis, o tai padeda patenkinti rinkos poreikius. Tačiau ši geresnė buveinė lėmė reikšmingus YCH metabolitų pokyčius; ar tai yra palanki YCH kokybei gerinti ir kaip moksliškai pagrįstomis auginimo priemonėmis pasiekti aukštos kokybės YCH gamybą, reikės atlikti tolesnius tyrimus.Imituojamasis buveinių auginimas – tai laukinių vaistinių augalų buveinių ir aplinkos sąlygų modeliavimo metodas, pagrįstas žiniomis apie ilgalaikį augalų prisitaikymą prie specifinių aplinkos veiksnių.43]. Imituojant įvairius aplinkos veiksnius, turinčius įtakos laukiniams augalams, ypač originalioms augalų, naudojamų kaip autentiškų vaistinių medžiagų šaltiniai, buveinė, metodas naudoja mokslinį dizainą ir naujovišką žmogaus įsikišimą, kad subalansuotų Kinijos vaistinių augalų augimą ir antrinę metabolizmą.43]. Metodų tikslas – pasiekti optimalias sąlygas aukštos kokybės vaistinių medžiagų kūrimui. Imituojantis buveinių auginimas turėtų būti veiksmingas būdas kokybiškai gaminti YCH net tada, kai farmakodinaminis pagrindas, kokybės žymenys ir reakcijos į aplinkos veiksnius mechanizmai yra neaiškūs. Atitinkamai siūlome, kad mokslinės projektavimo ir lauko valdymo priemonės auginant ir gaminant YCH turėtų būti vykdomos atsižvelgiant į laukinių YCH aplinkos ypatybes, tokias kaip sausringos, nederlingos ir smėlio dirvožemio sąlygos. Kartu taip pat tikimasi, kad mokslininkai atliks išsamesnius YCH funkcinės materialinės bazės ir kokybės žymenų tyrimus. Šios studijos gali pateikti efektyvesnius YCH vertinimo kriterijus, skatinti kokybišką gamybą ir tvarią pramonės plėtrą. -
Žolelių Fructus Amomi aliejus Natūralus masažo difuzorius 1kg Bulk Amomum villosum eterinis aliejus
Zingiberaceae šeima alelopatiniuose tyrimuose sulaukia vis daugiau dėmesio dėl gausių lakiųjų aliejų ir jos narių rūšių aromatingumo. Ankstesni tyrimai parodė, kad cheminės medžiagos iš Curcuma zedoaria (zedoary) [40], Alpinia zerumbet (Pers.) BLBurtt & RMSm. [41] ir Zingiber officinale Rosc. [42] imbiero šeimos turi alelopatinį poveikį kukurūzų, salotų ir pomidorų sėklų daigumui ir daigų augimui. Mūsų dabartinis tyrimas yra pirmasis pranešimas apie A. villosum (Zingiberaceae šeimos nario) stiebų, lapų ir jaunų vaisių lakiųjų medžiagų alelopatinį aktyvumą. Stiebų, lapų ir jaunų vaisių aliejaus derlius buvo atitinkamai 0,15%, 0,40% ir 0,50%, o tai rodo, kad vaisiai išskiria didesnį lakiųjų aliejų kiekį nei stiebai ir lapai. Pagrindiniai lakiųjų aliejų iš stiebų komponentai buvo β-pinenas, β-fellandrenas ir α-pinenas, kurių modelis buvo panašus į pagrindinių lapų aliejaus cheminių medžiagų, β-pineno ir α-pineno (monoterpeno angliavandenilių) modelį. Kita vertus, jaunų vaisių aliejuje buvo daug bornilo acetato ir kamparo (deguonies prisotintų monoterpenų). Rezultatus patvirtino Do N Dai [30,32] ir Hui Ao [31] kurie buvo atpažinę įvairių A. villosum organų aliejus.
Buvo keletas pranešimų apie šių pagrindinių junginių augalų augimą slopinančius aktyvumus kitose rūšyse. Shalinderis Kauras nustatė, kad eukalipto α-pinenas aiškiai sumažino Amaranthus viridis L. šaknų ilgį ir ūglių aukštį, kai koncentracija yra 1,0 μl.43], o kitas tyrimas parodė, kad α-pinenas slopina ankstyvą šaknų augimą ir sukėlė oksidacinį pažeidimą šaknies audiniuose, padidindamas reaktyviųjų deguonies rūšių susidarymą.44]. Kai kuriuose pranešimuose teigiama, kad β-pinenas slopino bandomųjų piktžolių daigumą ir daigų augimą priklausomai nuo dozės, sutrikdydamas membranos vientisumą.45], keičiant augalų biochemiją ir didinant peroksidazių ir polifenoloksidazių aktyvumą [46]. β-fellandrenas maksimaliai slopino Vigna unguiculata (L.) Walp daigumą ir augimą, kai koncentracija buvo 600 ppm [47], o esant 250 mg/m3 koncentracijai kamparas slopino Lepidium sativum L šaknų ir ūglių augimą.48]. Tačiau tyrimų apie alelopatinį bornilacetato poveikį yra nedaug. Mūsų tyrime nustatyta, kad β-pineno, bornilo acetato ir kamparo alelopatinis poveikis šaknų ilgiui buvo silpnesnis nei lakiųjų aliejų, išskyrus α-pineną, o lapų aliejus, kuriame gausu α-pineno, taip pat buvo fitotoksiškesnis nei atitinkamas lakusis aliejus. aliejus iš A. villosum stiebų ir vaisių, abu radiniai rodo, kad α-pinenas gali būti svarbi šios rūšies alelopatijos cheminė medžiaga. Tuo pačiu metu rezultatai taip pat reiškė, kad kai kurie junginiai vaisių aliejuje, kurių nebuvo gausu, gali prisidėti prie fitotoksinio poveikio atsiradimo, o tai ateityje turi būti toliau tiriama.Normaliomis sąlygomis alelopatinis alelocheminių medžiagų poveikis yra būdingas rūšiai. Jiang ir kt. nustatyta, kad eterinis aliejus, pagamintas Artemisia sieversiana, darė stipresnį poveikį Amaranthus retroflexus L. nei Medicago sativa L., Poa annua L. ir Pennisetum alopecuroides (L.) Spreng. [49]. Kitame tyrime Lavandula angustifolia Mill. sukėlė skirtingo laipsnio fitotoksinį poveikį skirtingoms augalų rūšims. Lolium multiflorum Lam. buvo jautriausia akceptorinė rūšis, hipokotilas ir radikalų augimas buvo slopinamas atitinkamai 87,8% ir 76,7%, vartojant 1 μL/mL aliejaus dozę, tačiau agurkų daigų hipokotilinis augimas buvo beveik paveiktas [20]. Mūsų rezultatai taip pat parodė, kad L. sativa ir L. perenne jautrumas A. villosum lakiosioms medžiagoms skiriasi.Tos pačios rūšies lakieji junginiai ir eteriniai aliejai gali skirtis kiekybiškai ir (arba) kokybiškai dėl augimo sąlygų, augalų dalių ir aptikimo metodų. Pavyzdžiui, ataskaitoje parodyta, kad piranoidas (10,3 %) ir β-kariofilenas (6,6 %) buvo pagrindiniai lakiųjų medžiagų, išsiskiriančių iš Sambucus nigra lapų, junginiai, o benzaldehidas (17,8 %), α-bulnezenas (16,6 %) ir tetrakozanas. (11,5%) buvo gausu iš lapų išgautuose aliejuose [50]. Mūsų tyrime lakieji junginiai, kuriuos išskiria šviežios augalinės medžiagos, turėjo stipresnį alelopatinį poveikį bandomiesiems augalams nei ekstrahuoti lakieji aliejai, o atsako skirtumai buvo glaudžiai susiję su alelocheminių medžiagų, esančių dviejuose preparatuose, skirtumais. Tikslūs lakiųjų junginių ir aliejų skirtumai turi būti toliau tiriami vėlesniuose eksperimentuose.Mikrobų įvairovės ir mikrobų bendruomenės struktūros skirtumai dirvožemio mėginiuose, į kuriuos buvo pridėta lakiųjų aliejų, buvo susiję su mikroorganizmų konkurencija, taip pat su bet kokiu toksišku poveikiu ir lakiųjų aliejų trukme dirvožemyje. Vokou ir Liotiri [51] nustatė, kad atitinkamai keturių eterinių aliejų (0,1 ml) panaudojimas dirbamoje dirvoje (150 g) suaktyvino dirvožemio mėginių kvėpavimą, net aliejai skiriasi savo chemine sudėtimi, o tai rodo, kad augaliniai aliejai yra naudojami kaip anglies ir energijos šaltinis. atsirandantys dirvožemio mikroorganizmai. Šio tyrimo metu gauti duomenys patvirtino, kad viso A. villosum augalo aliejai prisidėjo prie akivaizdaus dirvožemio grybų skaičiaus padidėjimo 14 dieną po aliejaus įpylimo, o tai rodo, kad aliejus gali būti anglies šaltinis daugiau. dirvožemio grybai. Kitame tyrime buvo nustatytas atradimas: dirvožemio mikroorganizmai atgavo pradinę funkciją ir biomasę po laikino svyravimų laikotarpio, kurį sukėlė Thymbra capitata L. (Cav) aliejaus pridėjimas, tačiau aliejaus dozė buvo didžiausia (0,93 µl aliejaus vienam gramui dirvožemio) neleido dirvožemio mikroorganizmams atkurti pradinio funkcionalumo [52]. Dabartiniame tyrime, remiantis dirvožemio mikrobiologine analize po apdorojimo skirtingomis dienomis ir koncentracijomis, mes spėliojome, kad dirvožemio bakterijų bendruomenė atsigaus po daugiau dienų. Priešingai, grybelinė mikrobiota negali grįžti į pradinę būseną. Šią hipotezę patvirtina šie rezultatai: aiškus didelės aliejaus koncentracijos poveikis dirvožemio grybelio mikrobiomo sudėčiai buvo atskleistas pagrindinių koordinačių analize (PCoA), o šilumos žemėlapio pristatymai dar kartą patvirtino, kad dirvožemio grybų bendruomenės sudėtis. apdorotas 3,0 mg/ml aliejaus (būtent 0,375 mg aliejaus vienam gramui dirvožemio) genties lygiu labai skyrėsi nuo kitų gydymo būdų. Šiuo metu tyrimų apie monoterpeninių angliavandenilių arba deguonies prisotintų monoterpenų pridėjimo poveikį dirvožemio mikrobų įvairovei ir bendruomenės struktūrai vis dar nėra. Keli tyrimai pranešė, kad α-pinenas padidino dirvožemio mikrobų aktyvumą ir santykinį Methylophilaceae (metilotrofų grupės, proteobakterijų) gausą esant mažam drėgmės kiekiui, vaidina svarbų anglies šaltinio vaidmenį sausesniuose dirvožemiuose.53]. Panašiai, lakiasis viso augalo A. villosum aliejus, kuriame yra 15,03 % α-pineno (Papildoma lentelė S1), akivaizdžiai padidino santykinį proteobakterijų gausą 1, 5 mg / ml ir 3, 0 mg / ml, o tai rodo, kad α-pinenas gali veikti kaip vienas iš anglies šaltinių dirvožemio mikroorganizmams.Lakieji junginiai, kuriuos gamina įvairūs A. villosum organai, turėjo įvairaus laipsnio alelopatinį poveikį L. sativa ir L. perenne, kuris buvo glaudžiai susijęs su cheminėmis sudedamosiomis dalimis, esančiomis A. villosum augalų dalyse. Nors lakiosios alyvos cheminė sudėtis buvo patvirtinta, A. villosum kambario temperatūroje išskiriami lakieji junginiai nežinomi, todėl reikia tolesnio tyrimo. Be to, verta atsižvelgti į skirtingų alelocheminių medžiagų sinerginį poveikį. Kalbant apie dirvožemio mikroorganizmus, norint visapusiškai ištirti lakiosios alyvos poveikį dirvožemio mikroorganizmams, vis dar turime atlikti išsamesnius tyrimus: pailginti lakiosios alyvos apdorojimo laiką ir pastebėti lakiosios alyvos cheminės sudėties pokyčius dirvožemyje. skirtingomis dienomis. -
Grynas Artemisia capillaris aliejus žvakėms ir muilui gaminti didmeninis difuzinis eterinis aliejus naujas skirtas nendrių deginimo difuzoriams
Graužikų modelio dizainas
Gyvūnai buvo atsitiktinai suskirstyti į penkias grupes po penkiolika pelių. Kontrolinės grupės ir pavyzdinės grupės pelėms buvo zonduojamasezamo aliejus6 dienoms. Teigiamos kontrolinės grupės pelės buvo maitinamos bifendato tabletėmis (BT, 10 mg/kg) 6 dienas. Eksperimentinės grupės 6 dienas buvo gydomos 100 mg/kg ir 50 mg/kg AEO, ištirpinto sezamo aliejuje. 6 dieną kontrolinė grupė buvo gydoma sezamų aliejumi, o visos kitos grupės buvo gydomos viena 0,2% CCl4 doze sezamo aliejuje (10 ml/kg).intraperitoninė injekcija. Tada pelės buvo nevalgytos be vandens, o kraujo mėginiai buvo paimti iš retrobulbarinių kraujagyslių; surinktas kraujas buvo centrifuguojamas 3000 ×g10 min., kad atskirtų serumą.Gimdos kaklelio išnirimasbuvo atliktas iš karto po kraujo paėmimo, o kepenų mėginiai buvo nedelsiant paimti. Viena kepenų mėginio dalis buvo nedelsiant laikoma –20 °C temperatūroje iki analizės, o kita dalis buvo išpjauta ir fiksuota 10 proc.formalinastirpalas; likę audiniai buvo laikomi –80 °C temperatūroje histopatologinei analizei (Wang ir kt., 2008 m,Hsu ir kt., 2009 m,Nie ir kt., 2015 m).
Biocheminių parametrų matavimas serume
Kepenų pažeidimas buvo įvertintas įvertinusfermentinė veiklaserumo ALT ir AST, naudojant atitinkamus komercinius rinkinius pagal rinkinių instrukcijas (Nankinas, Jiangsu provincija, Kinija). Fermentinis aktyvumas buvo išreikštas vienetais litre (U/l).
MDA, SOD, GSH ir GSH-P matavimasxkepenų homogenatuose
Kepenų audiniai buvo homogenizuoti šaltu fiziologiniu tirpalu santykiu 1:9 (m/t, kepenys:fiziologinis tirpalas). Homogenatai buvo centrifuguoti (2500 ×g10 min.), kad būtų surinkti supernatantai tolesniems tyrimams. Kepenų pažeidimas buvo įvertintas pagal kepenų matavimus MDA ir GSH lygius, taip pat SOD ir GSH-Pxveikla. Visa tai buvo nustatyta pagal rinkinyje pateiktas instrukcijas (Nandzingas, Jiangsu provincija, Kinija). MDA ir GSH rezultatai buvo išreikšti nmol viename mg baltymo (nmol/mg prot), o SOD ir GSH-P aktyvumas.xbuvo išreikšti U vienam mg baltymo (U/mg prot).
Histopatologinė analizė
Šviežiai gautų kepenų dalys buvo fiksuotos 10% buferyjeparaformaldehidasfosfato tirpalas. Tada mėginys buvo įdėtas į parafiną, supjaustytas 3–5 μm pjūviais, nudažytashematoksilinasireozino(H&E) pagal standartinę procedūrą ir galiausiai išanalizavošviesos mikroskopija(Tianas ir kt., 2012 m).
Statistinė analizė
Rezultatai buvo išreikšti kaip vidurkis ± standartinis nuokrypis (SD). Rezultatai analizuoti naudojant statistikos programą SPSS Statistics, 19.0 versija. Duomenims buvo atlikta dispersinė analizė (ANOVA,p< 0,05), po to Dunnett testas ir Dunnett T3 testas, siekiant nustatyti statistiškai reikšmingus įvairių eksperimentinių grupių reikšmių skirtumus. Reikšmingas skirtumas buvo laikomas lygiup< 0,05.
Rezultatai ir diskusija
AEO sudedamosios dalys
Atlikus GC/MS analizę, nustatyta, kad AEO yra 25 sudedamosios dalys, eliuuojamos nuo 10 iki 35 min., ir nustatyta 21 sudedamoji dalis, sudaranti 84 % eterinio aliejaus (1 lentelė). Sudėtyje esančios lakiosios alyvosmonoterpenoidai(80,9%), seskviterpenoidai (9,5%), sotieji nešakotieji angliavandeniliai (4,86%) ir įvairus acetilenas (4,86%). Palyginti su kitais tyrimais (Guo ir kt., 2004 m), AEO radome daug monoterpenoidų (80,90 %). Rezultatai parodė, kad gausiausia AEO sudedamoji dalis yra β-citronellolis (16,23%). Kiti pagrindiniai AEO komponentai yra 1,8-cineolis (13,9 %),kamparas(12,59 %),linalolas(11,33%), α-pinenas (7,21%), β-pinenas (3,99%),timolis(3,22 proc.), irmirceno(2,02 proc.). Cheminės sudėties kitimas gali būti susijęs su aplinkos sąlygomis, kuriomis augalas buvo veikiamas, pavyzdžiui, mineraliniu vandeniu, saulės spinduliais, vystymosi stadija irmityba.
-
Grynas Saposhnikovia divaricata aliejus žvakėms ir muilui gaminti didmeninis difuzorius eterinis aliejus naujas skirtas nendrių deginimo difuzoriams
2.1. SDE rengimas
SD šakniastiebiai buvo įsigyti kaip džiovinta žolė iš Hanherb Co. (Guri, Korėja). Augalines medžiagas taksonomiškai patvirtino Dr. Go-Ya Choi iš Korėjos Rytų medicinos instituto (KIOM). Kupono pavyzdys (numeris 2014 SDE-6) buvo deponuotas Korėjos standartinių žolelių išteklių herbariume. Džiovinti SD šakniastiebiai (320 g) buvo du kartus ekstrahuoti 70% etanoliu (su grįžtamu šaldytuvu 2 val.), o po to ekstraktas sukoncentruotas sumažintame slėgyje. Nuoviras filtruojamas, liofilizuojamas ir laikomas 4 °C temperatūroje. Sauso ekstrakto išeiga iš neapdorotų pradinių medžiagų buvo 48,13 % (m/m).
2.2. Kiekybinė didelio efektyvumo skysčių chromatografijos (HPLC) analizė
Chromatografinė analizė atlikta naudojant HPLC sistemą (Waters Co., Milford, MA, JAV) ir fotodiodų matricos detektorių. SDE HPLC analizei pirminisO- gliukozilcimifugino standartas buvo įsigytas iš Korėjos tradicinės medicinos pramonės skatinimo instituto (Gyeongsan, Korėja), irsec-O-gliukozilhamaudolis ir 4′-O-β-D-gliukozil-5-O-metilvisaminolis buvo išskirtas mūsų laboratorijoje ir identifikuotas spektrinėmis analizėmis, pirmiausia BMR ir MS.
SDE mėginiai (0,1 mg) buvo ištirpinti 70% etanolyje (10 ml). Chromatografinis atskyrimas buvo atliktas naudojant XSelect HSS T3 C18 kolonėlę (4,6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milfordas, MA, JAV). Mobiliąją fazę sudarė acetonitrilas (A) ir 0,1 % acto rūgšties vandenyje (B), tekėjimo greičiu 1,0 ml/min. Buvo naudojama daugiapakopė gradiento programa: 5% A (0 min.), 5–20% A (0–10 min.), 20% A (10–23 min.) ir 20–65% A (23–40 min. ). Aptikimo bangos ilgis buvo nuskaitytas esant 210–400 nm ir užregistruotas esant 254 nm. Įpurškimo tūris buvo 10,0μL. Trims chromonams nustatyti buvo paruošti standartiniai tirpalai, kurių galutinė koncentracija buvo 7,781 mg/mL (pirm.O-gliukozilcimifuginas), 31,125 mg/ml (4′-O-β-D-gliukozil-5-O-metilvisaminolio) ir 31,125 mg/ml (sec-O-gliukozilhamaudolis) metanolyje ir laikomas 4 °C temperatūroje.
2.3. Priešuždegiminės veiklos įvertinimasIn vitro
2.3.1. Ląstelių kultūra ir mėginių apdorojimas
RAW 264.7 ląstelės buvo gautos iš Amerikos tipo kultūrų kolekcijos (ATCC, Manassas, VA, JAV) ir auginamos DMEM terpėje, kurioje yra 1% antibiotikų ir 5,5% FBS. Ląstelės buvo inkubuojamos drėgnoje 5% CO2 atmosferoje 37 °C temperatūroje. Norint stimuliuoti ląsteles, terpė buvo pakeista šviežia DMEM terpe ir lipopolisacharidu (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, JAV) esant 1μg/ml buvo pridėta esant arba nesant SDE (200 arba 400μg/mL) dar 24 val.
2.3.2. Azoto oksido (NO), prostaglandino E2 (PGE2), naviko nekrozės faktoriaus nustatymasα(TNF-α), ir interleukino-6 (IL-6) gamyba
Ląstelės buvo apdorotos SDE ir stimuliuojamos LPS 24 valandas. NO gamyba buvo analizuojama matuojant nitritus naudojant Griess reagentą pagal ankstesnį tyrimą [12]. Uždegiminių citokinų PGE2, TNF- sekrecijaα, o IL-6 buvo nustatytas naudojant ELISA rinkinį (R&D sistemos) pagal gamintojo instrukcijas. SDE poveikis NO ir citokinų gamybai buvo nustatytas esant 540 nm arba 450 nm, naudojant Wallac EnVision™mikroplokštelių skaitytuvas (PerkinElmer).
2.4. Antiosteoartrito aktyvumo įvertinimasIn Vivo
2.4.1. Gyvūnai
Sprague-Dawley žiurkių patinai (7 savaičių amžiaus) buvo įsigyti iš Samtako Inc. (Osana, Korėja) ir laikomi kontroliuojamomis sąlygomis su 12 valandų šviesos / tamsos ciklu°C ir% drėgmės. Žiurkėms buvo suteiktas laboratorinis maistas ir vanduoad libitum. Visos eksperimentinės procedūros buvo atliktos laikantis Nacionalinių sveikatos institutų (NIH) gairių ir patvirtintos Tedžono universiteto (Tedžonas, Korėjos Respublika) Gyvūnų priežiūros ir naudojimo komiteto.
2.4.2. OA indukcija su MIA žiurkėms
Gyvūnai buvo atsitiktinai suskirstyti į gydymo grupes prieš pradedant tyrimą (vienai grupei). MIA tirpalas (3 mg/50μL 0, 9% fiziologinio tirpalo) buvo tiesiogiai švirkščiama į dešiniojo kelio intraartikuliarinę erdvę, taikant anesteziją, sukeltą ketamino ir ksilazino mišiniu. Žiurkės buvo atsitiktinai suskirstytos į keturias grupes: (1) fiziologinio tirpalo grupę be MIA injekcijos, (2) MIA grupę su MIA injekcija, (3) SDE gydytų grupę (200 mg/kg) su MIA injekcija ir (4) ) indometacinu (IM-) gydyta grupė (2 mg/kg) su MIA injekcija. Žiurkės buvo vartojamos per burną su SDE ir IM 1 savaitę prieš MIA injekciją 4 savaites. Šiame tyrime naudotos SDE ir IM dozės buvo pagrįstos ankstesniuose tyrimuose naudotomis dozėmis.10,13,14].
2.4.3. Užpakalinės pėdos svorio guolio pasiskirstymo matavimai
Po OA indukcijos buvo sutrikdyta pradinė užpakalinių letenų gebėjimo išlaikyti svorį pusiausvyra. Neįgalumo testeris (Linton instrumentation, Norfolkas, JK) buvo naudojamas svorio kėlimo tolerancijos pokyčiams įvertinti. Žiurkės buvo atsargiai įdėtos į matavimo kamerą. Užpakalinės galūnės svoriui tenkančios jėgos vidurkis buvo apskaičiuotas per 3 s. Svorio pasiskirstymo santykis buvo apskaičiuotas pagal šią lygtį: [dešinės užpakalinės galūnės svoris/(svoris ant dešinės galūnės + svoris ant kairės užpakalinės galūnės)] × 100 [15].
2.4.4. Citokinų kiekio serume matavimai
Kraujo mėginiai buvo centrifuguojami 1500 g 10 minučių 4 °C temperatūroje; tada serumas buvo surinktas ir iki naudojimo laikomas –70 °C temperatūroje. IL-1 lygisβ, IL-6, TNF-α, ir PGE2 serume buvo išmatuoti naudojant ELISA rinkinius iš R&D Systems (Mineapolis, MN, JAV) pagal gamintojo instrukcijas.
2.4.5. Realaus laiko kiekybinė RT-PGR analizė
Bendra RNR buvo išgauta iš kelio sąnario audinio naudojant TRI reagentą® (Sigma-Aldrich, Sent Luisas, MO, JAV), atvirkštiniu būdu transkribuota į cDNR ir PGR amplifikuota naudojant TM One Step RT PGR rinkinį su SYBR žalia (Applied Biosystems). , Grand Island, NY, JAV). Realaus laiko kiekybinė PGR buvo atlikta naudojant Applied Biosystems 7500 Real-Time PGR sistemą (Applied Biosystems, Grand Island, NY, JAV). Pradmenų sekos ir zondo seka parodyta lentelėje1. Mėginių cDNR ir vienodo kiekio GAPDH cDNR alikvotinės dalys buvo amplifikuotos su TaqMan® Universal PCR pagrindiniu mišiniu, turinčiu DNR polimerazės pagal gamintojo instrukcijas (Applied Biosystems, Foster, CA, JAV). PGR sąlygos buvo 2 minutės 50 ° C temperatūroje, 10 minučių 94 ° C temperatūroje, 15 s 95 ° C temperatūroje ir 1 minutė 60 ° C temperatūroje 40 ciklų. Tikslinio geno koncentracija buvo nustatyta naudojant lyginamąjį Ct (slenkstinis ciklo skaičius kryžminiame taške tarp amplifikacijos diagramos ir slenksčio) pagal gamintojo instrukcijas.
