Grynas Saposhnikovia divaricata aliejus žvakėms ir muilui gaminti didmeninis difuzorius eterinis aliejus naujas skirtas nendrių deginimo difuzoriams

trumpas aprašymas:

2.1. SDE rengimas

SD šakniastiebiai buvo įsigyti kaip džiovinta žolė iš Hanherb Co. (Guri, Korėja). Augalines medžiagas taksonomiškai patvirtino Dr. Go-Ya Choi iš Korėjos Rytų medicinos instituto (KIOM). Kupono pavyzdys (numeris 2014 SDE-6) buvo deponuotas Korėjos standartinių žolelių išteklių herbariume. Džiovinti SD šakniastiebiai (320 g) buvo du kartus ekstrahuoti 70% etanoliu (su grįžtamu šaldytuvu 2 val.), o po to ekstraktas sukoncentruotas sumažintame slėgyje. Nuoviras filtruojamas, liofilizuojamas ir laikomas 4 °C temperatūroje. Sauso ekstrakto išeiga iš neapdorotų pradinių medžiagų buvo 48,13 % (m/m).

2.2. Kiekybinė didelio efektyvumo skysčių chromatografijos (HPLC) analizė

Chromatografinė analizė atlikta naudojant HPLC sistemą (Waters Co., Milford, MA, JAV) ir fotodiodų matricos detektorių. SDE HPLC analizei pirminisO- gliukozilcimifugino standartas buvo įsigytas iš Korėjos tradicinės medicinos pramonės skatinimo instituto (Gyeongsan, Korėja), irsec-O-gliukozilhamaudolis ir 4′-O-β-D-gliukozil-5-O-metilvisaminolis buvo išskirtas mūsų laboratorijoje ir identifikuotas spektrinėmis analizėmis, pirmiausia BMR ir MS.

SDE mėginiai (0,1 mg) buvo ištirpinti 70% etanolyje (10 ml). Chromatografinis atskyrimas buvo atliktas naudojant XSelect HSS T3 C18 kolonėlę (4,6 × 250 mm, 5μm, Waters Co., Milfordas, MA, JAV). Mobiliąją fazę sudarė acetonitrilas (A) ir 0,1 % acto rūgšties vandenyje (B), tekėjimo greičiu 1,0 ml/min. Buvo naudojama daugiapakopė gradiento programa: 5% A (0 min.), 5–20% A (0–10 min.), 20% A (10–23 min.) ir 20–65% A (23–40 min. ). Aptikimo bangos ilgis buvo nuskaitytas esant 210–400 nm ir užregistruotas esant 254 nm. Įpurškimo tūris buvo 10,0μL. Trims chromonams nustatyti buvo paruošti standartiniai tirpalai, kurių galutinė koncentracija buvo 7,781 mg/mL (pirm.O-gliukozilcimifuginas), 31,125 mg/ml (4′-O-β-D-gliukozil-5-O-metilvisaminolio) ir 31,125 mg/ml (sec-O-gliukozilhamaudolis) metanolyje ir laikomas 4 °C temperatūroje.

2.3. Priešuždegiminės veiklos įvertinimasIn vitro

2.3.1. Ląstelių kultūra ir mėginių apdorojimas

RAW 264.7 ląstelės buvo gautos iš Amerikos tipo kultūrų kolekcijos (ATCC, Manassas, VA, JAV) ir auginamos DMEM terpėje, kurioje yra 1% antibiotikų ir 5,5% FBS. Ląstelės buvo inkubuojamos drėgnoje 5% CO2 atmosferoje 37 °C temperatūroje. Norint stimuliuoti ląsteles, terpė buvo pakeista šviežia DMEM terpe ir lipopolisacharidu (LPS, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, JAV) esant 1μg/ml buvo pridėta esant arba nesant SDE (200 arba 400μg/mL) dar 24 val.

2.3.2. Azoto oksido (NO), prostaglandino E2 (PGE2), naviko nekrozės faktoriaus nustatymasα(TNF-α), ir interleukino-6 (IL-6) gamyba

Ląstelės buvo apdorotos SDE ir stimuliuojamos LPS 24 valandas. NO gamyba buvo analizuojama matuojant nitritus naudojant Griess reagentą pagal ankstesnį tyrimą [12]. Uždegiminių citokinų PGE2, TNF- sekrecijaα, o IL-6 buvo nustatytas naudojant ELISA rinkinį (R&D sistemos) pagal gamintojo instrukcijas. SDE poveikis NO ir citokinų gamybai buvo nustatytas esant 540 nm arba 450 nm, naudojant Wallac EnVision™mikroplokštelių skaitytuvas (PerkinElmer).

2.4. Antiosteoartrito aktyvumo įvertinimasIn Vivo

2.4.1. Gyvūnai

Sprague-Dawley žiurkių patinai (7 savaičių amžiaus) buvo įsigyti iš Samtako Inc. (Osana, Korėja) ir laikomi kontroliuojamomis sąlygomis su 12 valandų šviesos / tamsos ciklu°C ir% drėgmės. Žiurkėms buvo suteiktas laboratorinis maistas ir vanduoad libitum. Visos eksperimentinės procedūros buvo atliktos laikantis Nacionalinių sveikatos institutų (NIH) gairių ir patvirtintos Tedžono universiteto (Tedžonas, Korėjos Respublika) Gyvūnų priežiūros ir naudojimo komiteto.

2.4.2. OA indukcija su MIA žiurkėms

Gyvūnai buvo atsitiktinai suskirstyti į gydymo grupes prieš pradedant tyrimą (vienai grupei). MIA tirpalas (3 mg/50μL 0, 9% fiziologinio tirpalo) buvo tiesiogiai švirkščiama į dešiniojo kelio intraartikuliarinę erdvę, taikant anesteziją, sukeltą ketamino ir ksilazino mišiniu. Žiurkės buvo atsitiktinai suskirstytos į keturias grupes: (1) fiziologinio tirpalo grupę be MIA injekcijos, (2) MIA grupę su MIA injekcija, (3) SDE gydytų grupę (200 mg/kg) su MIA injekcija ir (4) ) indometacinu (IM-) gydyta grupė (2 mg/kg) su MIA injekcija. Žiurkės buvo vartojamos per burną su SDE ir IM 1 savaitę prieš MIA injekciją 4 savaites. Šiame tyrime naudotos SDE ir IM dozės buvo pagrįstos ankstesniuose tyrimuose naudotomis dozėmis.10,13,14].

2.4.3. Užpakalinės pėdos svorio guolio pasiskirstymo matavimai

Po OA indukcijos buvo sutrikdyta pradinė užpakalinių letenų gebėjimo išlaikyti svorį pusiausvyra. Neįgalumo testeris (Linton instrumentation, Norfolkas, JK) buvo naudojamas svorio kėlimo tolerancijos pokyčiams įvertinti. Žiurkės buvo atsargiai įdėtos į matavimo kamerą. Užpakalinės galūnės svoriui tenkančios jėgos vidurkis buvo apskaičiuotas per 3 s. Svorio pasiskirstymo santykis buvo apskaičiuotas pagal šią lygtį: [dešinės užpakalinės galūnės svoris/(svoris ant dešinės galūnės + svoris ant kairės užpakalinės galūnės)] × 100 [15].

2.4.4. Citokinų kiekio serume matavimai

Kraujo mėginiai buvo centrifuguojami 1500 g 10 minučių 4 °C temperatūroje; tada serumas buvo surinktas ir iki naudojimo laikomas –70 °C temperatūroje. IL-1 lygisβ, IL-6, TNF-α, ir PGE2 serume buvo išmatuoti naudojant ELISA rinkinius iš R&D Systems (Mineapolis, MN, JAV) pagal gamintojo instrukcijas.

2.4.5. Realaus laiko kiekybinė RT-PGR analizė

Bendra RNR buvo išgauta iš kelio sąnario audinio naudojant TRI reagentą® (Sigma-Aldrich, Sent Luisas, MO, JAV), atvirkštiniu būdu transkribuota į cDNR ir PGR amplifikuota naudojant TM One Step RT PGR rinkinį su SYBR žalia (Applied Biosystems). , Grand Island, NY, JAV). Realaus laiko kiekybinė PGR buvo atlikta naudojant Applied Biosystems 7500 Real-Time PGR sistemą (Applied Biosystems, Grand Island, NY, JAV). Pradmenų sekos ir zondo seka parodyta lentelėje1. Mėginių cDNR ir vienodo kiekio GAPDH cDNR alikvotinės dalys buvo amplifikuotos su TaqMan® Universal PCR pagrindiniu mišiniu, turinčiu DNR polimerazės pagal gamintojo instrukcijas (Applied Biosystems, Foster, CA, JAV). PGR sąlygos buvo 2 minutės 50 ° C temperatūroje, 10 minučių 94 ° C temperatūroje, 15 s 95 ° C temperatūroje ir 1 minutė 60 ° C temperatūroje 40 ciklų. Tikslinio geno koncentracija buvo nustatyta naudojant lyginamąjį Ct (slenkstinis ciklo skaičius kryžminiame taške tarp amplifikacijos diagramos ir slenksčio) pagal gamintojo instrukcijas.

FOB kaina:0,5–9 999 USD / vnt

Minimalus užsakymo kiekis:100 vienetų / vienetų

Tiekimo galimybės:10 000 vienetų / vienetų per mėnesį

Atsiųskite mums el

Produkto detalė

Produkto etiketės

Osteoartritas (OA) yra dažniausia raumenų ir kaulų sistemos liga bei dažniausia vyresnio amžiaus žmonių degeneracinė sąnarių liga.1]. OA yra būklė, kurią iš dalies sukelia sužalojimas, kremzlės struktūros ir funkcijos praradimas bei priešuždegiminių ir priešuždegiminių takų reguliavimas.2,3]. Jis pirmiausia pažeidžia sąnarių kremzles ir sinovinių sąnarių subchondrinį kaulą ir sukelia sąnarių nepakankamumą, sukeliantį skausmą nešant svorį, įskaitant vaikštant ir stovint.4].

OA nėra išgydoma, nes labai sunku atkurti kremzlę, kai ji sunaikinta [5]. Gydymo tikslai – malšinti skausmą, palaikyti ar pagerinti sąnarių judrumą, padidinti sąnarių stiprumą ir iki minimumo sumažinti negalią sukeliantį ligos poveikį. Farmakologinis OA gydymas skirtas sumažinti skausmą, siekiant pagerinti paciento sąnarių funkciją ir gyvenimo kokybę. Nors kremzlės sunaikinimas yra pagrindinis OA įvykis, kolageno skilimas yra pagrindinis įvykis, lemiantis negrįžtamą OA progresavimą, susijusį su uždegimu.6,7]. Tikimasi, kad gydymas, turintis priešuždegiminį ir chondroprotekcinį poveikį, sumažins skausmą ir išlaikys matricos vientisumą pacientams, sergantiems OA.

Todėl uždegimo mažinimas greičiausiai bus naudingas gydant OA. Naujausi tyrimai rodo apsauginį vaistažolių išteklių vaidmenį OA progresavime, mažinant chondrocitų uždegimą ir tolesnį kremzlių sunaikinimą, nes jie gali sąveikauti su sąnariais susijusiais audiniais, todėl sumažėja sąnarių skausmas.8].

Šaknis išSaposhnikovia divaricataSchischkin (Umbelliferae) buvo plačiai naudojamas tradicinėje medicinoje galvos skausmui, skausmui, uždegimui ir artritui gydyti Korėjoje ir Kinijoje.9,10]. Įvairus farmakologinis poveikisSaposhnikovia divaricata(SD) taip pat turi priešuždegiminių, analgetinių, karščiavimą mažinančių ir antiartritinių savybių.9,11]. Neseniai atliktas tyrimas parodė, kad SD chromono ekstraktas turi galimą antireumatoidinio artrito poveikį kolageno sukelto artrito pelės modelyje.10]; tačiau atlikta nedaug tyrimų, patvirtinančių priešuždegiminį ir antiartritinį poveikįSaposhnikovia divaricataekstraktas (SDE).

Todėl šiame tyrime buvo tiriamas 70% SD etanolio ekstrakto priešuždegiminis ir antiosteoartritas. Pirmiausia buvo įvertintas SDE priešuždegiminis poveikisin vitroLPS sukeltose RAW 264.7 ląstelėse. Tada SDE antiosteoartritinis poveikis buvo matuojamas įvertinant svorio pasiskirstymą, sąnarių kremzlių degradaciją ir uždegiminius atsakus mononatrio jodoacetato (MIA) sukelto OA žiurkės modelyje.